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人臍帶單核細胞提取物操作要點
點擊次數(shù):505 更新時間:2023-03-02

人臍帶單核細胞提取物操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

alpha 2 Macroglobulinα2巨球蛋白抗體

ACCSLACCSL蛋白抗體

AFP甲胎蛋白抗體

Mint3β淀粉樣前體蛋白結合蛋白3抗體

ASTN2星形肌動蛋白抗體

TREX1系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體

phospho-ATRIP 磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關蛋白TREX1抗體

Phospho-ATRIP 磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體

AP2M1接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體

Phospho-AP2M1 磷酸化接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體

Annexin A7膜粘連蛋白7抗體

C3orf153號染色體開放閱讀框15抗體

APOB48R載脂蛋白B受體抗體

ABCA2三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白2抗體

ApoB 載脂蛋白B抗體

ALOX15B花生四烯酸15脂氧合酶2抗體

APOC4載脂蛋白C4抗體

ARH低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體

AUP1原始廣泛存在蛋白1抗體

ANKRD37錨蛋白重復結構域蛋白37抗體

A4GALTα1,4-半乳糖基轉移酶1

AGTRAP血管緊張素Ⅱ受體相關蛋白抗體


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