當(dāng)前位置：Elisa試劑盒檢測抗生素的原理
點(diǎn)擊次數(shù)：806 更新時間：2019-10-28
氨基糖類、四環(huán)素類、喹諾酮類、硝基呋喃類等。目前國內(nèi)外可以用ELISA方法檢測的抗生素有：、、四環(huán)素、、呋喃它酮、、、泰樂菌素、磺胺喹惡啉、、鹽霉素、磺胺類、阿維霉素、ELISA試劑盒檢測成本低靈敏度高檢測限通?？梢赃_(dá)到*，是一種理想的初篩方法。但由于ELISA方法存在一定的假陽性率，因此用美聯(lián)免疫吸附法測定的陽性樣品必須做進(jìn)一步的確定實(shí)驗。
現(xiàn)在已ELISA試劑盒檢測為例介紹；本試劑盒適用于牛奶、肉類、魚、蝦、血清、及蜂蜜中的殘留量的測定。
（一）測定原理
測定的基礎(chǔ)是抗原抗體放映。微孔板包被有針對兔IgG（抗體）的羊抗體。加入抗體、標(biāo)記物、標(biāo)準(zhǔn)或樣品溶液、游離與酶標(biāo)記物競爭抗體，同時抗體與羊抗體連接。沒有連接的酶標(biāo)記物在洗滌步驟中被去除。將酶基質(zhì)（過氧化尿素）和發(fā)色劑（四甲基聯(lián)苯胺）加入到空中并且孵育。結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物。加入反應(yīng)停止液后使眼色由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。在450nm處測量，吸收光強(qiáng)度與樣品中的濃度成正比
（二）試劑盒指標(biāo)
特異性
通過對形影的物質(zhì)進(jìn)行交叉反應(yīng)性分析得到
00%堿0.5%＜0.05%
余四環(huán)霉素變暗霉素?zé)o交叉反應(yīng)
回收率
牛奶＞80%魚蝦肉＞80%
蜂蜜＞80%蛋類＞80%
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、96孔（2條*8孔）包被有羊抗體。
2、濃縮標(biāo)準(zhǔn)液；為標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3、過氧化物酶標(biāo)記的濃縮液：0.7mL
4、抗體濃縮液0.7ml
5、基質(zhì)（7ml)含有氧化尿素
6、四甲基聯(lián)苯胺（TMB)30%過氧化氫，牛血清白蛋白，圖文20等
7、反應(yīng)停止液mol/L硫酸
8、緩沖液:00ml用于標(biāo)準(zhǔn)酶標(biāo)記物抗體樣品稀釋
9、緩沖液2：ml,用于測定牛奶樣品時的標(biāo)準(zhǔn)稀釋用緩沖液
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