當(dāng)前位置：滅鮭氣單胞菌PCR定量試劑盒陽性對照反應(yīng)體系
點(diǎn)擊次數(shù)：965 更新時(shí)間：2020-05-21
滅鮭氣單胞菌PCR定量試劑盒陽性對照反應(yīng)體系：
a）模板DNA：選用樣本純化的DNA。
b）引物的選擇：建議選擇該樣本較易擴(kuò)增的基因的引物，如 β-actin 基因或 GAPDH 等。
4.2 陰性對照
PCR反應(yīng)體系被污染會導(dǎo)致PCR結(jié)果出現(xiàn)假陽性，需要設(shè)置陰性對照來排除。將使用的移液器槍頭浸泡在2× Blood Master Mix中，添加引物，ddH2O進(jìn)行PCR擴(kuò)增；另取ddH2O作為模板，用目的基因引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，以排除PCR體系是否被污染和實(shí)驗(yàn)是否有其他污染源。
注意事項(xiàng)
. 盡量使用新鮮抗凝血。若凍存血，應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 解凍后2× Blood Master Mix可能出現(xiàn)渾濁，冰上放置-2 min，待溶液澄清后，上下顛倒混勻，不影響試劑性能。
3. 電泳檢測時(shí)，切勿使用含有 SDS 的Loading Buffer，否則在電泳時(shí)會在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長度 kb以內(nèi)，以便擴(kuò)增效率*。
5. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
