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大鼠結(jié)腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒【Rat Intestine PrimacellTM：Normal Colonic Smooth Muscle Cells】
     大鼠結(jié)腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運動方式。腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導(dǎo)致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生，這進一步證明了炎癥時的腸平滑肌細胞具有可塑性。利用腸平滑肌細胞的培養(yǎng)，可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結(jié)締組織對平滑肌細胞的反應(yīng)。 雖然結(jié)腸組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的結(jié)腸組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的結(jié)腸組織片能使得結(jié)腸組織中成結(jié)腸細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成結(jié)腸細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成結(jié)腸細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的成結(jié)腸原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠結(jié)腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成結(jié)腸組織細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠結(jié)腸平滑肌細胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠結(jié)腸平滑肌細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠結(jié)腸平滑肌細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）大鼠結(jié)腸平滑肌組織洗液（5x00 ml） （5）大鼠結(jié)腸平滑肌細胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠結(jié)腸平滑肌細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x00ml） （7）大鼠結(jié)腸平滑肌組織預(yù)備液（ x00 ml） （8）大鼠結(jié)腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
大鼠結(jié)腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

斯氏普羅菲登斯菌 Providencia stuartii

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

NC膜(0.22um)30cm × 3m，5cm x 20cm

稻梨孢 Pyricularia oryzae

人間充質(zhì)干細胞-脂肪

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

漢遜德巴利酵母 Colletotrichum gloeosporioides

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

大鼠腦成纖維細胞*培養(yǎng)基00mL

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大鼠結(jié)腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)6-氟-4-羥喹啉分子式：63.5英文名稱：6- -4- hydroxy group：39-78-6分子量： C9H6FNO

4-脲唑分子式：77.6英文名稱：4- phenyl urea：5988--分子量： C8H7N3O2

丙分子式：668.39英文名稱：Propidium iodide：25535-6-4分子量： C27H34I2N4

2,4-二氯-6,7-二甲氧喹唑啉分子式：259.09英文名稱：2,4- two, -6,7- two, a：2763-29-4分子量： C0H8Cl2N2O2

,3,5-三[(4-三氟甲磺酰氧)-3-(*硅)]分子式：967.2英文名稱：,3,5- three [(4- three) -3- (three methyl silicone) phenyl] benzene：847925-63-7分子量： C36H39F9O9S3Si3

羅丹明23英文名稱：Luo Danming 23分子式：380.82分子量： C2H7ClN2O3：62669-70-9

4-羥乙乙磺英文名稱：4- HEPES分子式：238.3分子量： C8H8N2O4S：7365-45-9

雙甲酮英文名稱：Double ketone分子式：40.8分子量： C8H2O2：26-8-8

4-溴異喹啉分子式：208.05英文名稱：4- bromide：532-97-4分子量： C9H6BrN

辛醛英文名稱：Xin Xiquan分子式：26.2分子量： C8H4O：2548-87-0

注意事項：
. 接收到大鼠結(jié)腸平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。