注意事項:
. 接收到小鼠腸靜脈組織提取物胞培養(yǎng),肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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產品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
小鼠腸靜脈組織提取物胞培養(yǎng) | Mouse Intestinal: Normal Intestinal Vein Derivatives | 來電可享受優(yōu)惠 |
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小鼠腸靜脈組織提取物胞【Mouse Intestinal: Normal Intestinal Vein Derivatives】
小鼠腸靜脈組織提取物胞培養(yǎng)小鼠腸靜脈是肝門靜脈的主要屬支,分為腸系膜上靜脈和腸系膜下靜脈。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠腸靜脈組織中高質量的總RNA,PCR準備的*條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應用: <>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。?
兔抗PIAS2多克隆抗體 英文名:Anti-PIAS2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗PIAS3多克隆抗體 英文名:Anti-PIAS3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗HTRA 多克隆抗體 英文名:Anti-HTRA rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃)
兔抗HTRA3多克隆抗體 英文名:Anti-HTRA3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗C44多克隆抗體 英文名:Anti-C44 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗LIN28B 多克隆抗體 英文名:Anti-LIN28B rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃)
兔抗HIRA多克隆抗體 英文名:Anti-HIRA rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗PITX3多克隆抗體 英文名:Anti-PITX3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗PRKCA多克隆抗體 英文名:Anti-PRKCA rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗PRKCB多克隆抗體 英文名:Anti-PRKCB rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗PRKCG多克隆抗體 英文名:Anti-PRKCG rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗AGL多克隆抗體 英文名:Anti-AGL rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
小鼠腸靜脈組織提取物胞培養(yǎng)Tiamulin 泰妙菌素 5g 瓶
抗熒光衰減封片劑 00ml 瓶
Ponceau S 麗春紅S 0g 瓶
Raddeanin A 竹節(jié)香附素A 8942-79-3 20mg
T型涂布棒(推樣器) 5支滅菌 包
胎牛血清 500ml 瓶
Doxycycline HCl 鹽酸 24390-4-5 00mg
Insulin 牛胰島素 25mg 支
Stevenleaf 絞股藍皂苷(混合物) 72063-39-9 20mg
Gum tragacanth powder 黃蓍樹膠粉 00g 瓶
細胞過濾篩(不銹鋼) 60目 個
培養(yǎng)步驟:
小鼠腸靜脈組織提取物胞培養(yǎng)對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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