AAV-293 (人胚腎細(xì)胞)

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用！

商品詳情：

別稱 AAV293

種屬 人類

年齡（性別） 胎兒

組織來(lái)源 腎；以腺病毒5DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述：AAV-293細(xì)胞源自普遍使用的293 [HEK-293]細(xì)胞株，但AAV-293細(xì)胞產(chǎn)生的病毒滴度更高。293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過(guò)的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞。跟293 [HEK-293]細(xì)胞一樣，AAV-293細(xì)胞反式表達(dá)腺病毒E1基因，當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個(gè)AAV助質(zhì)粒(一個(gè)含ITR的質(zhì)粒、pAAV-RC和E1缺失助質(zhì)粒)時(shí)，AAV-293細(xì)胞可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒；因此，我們推薦使用AAV-293細(xì)胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。

生物安全等級(jí) 2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

注意事項(xiàng) 該細(xì)胞貼壁松散，操作時(shí)請(qǐng)盡量輕柔；換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基；收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán)，為正?，F(xiàn)象，請(qǐng)按照收貨注意事項(xiàng)處理。

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠胱抑素SN(CST1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： CST1 ELISA Kit

Rabbit apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 兔載脂蛋白A1(apo-A1)檢測(cè)試劑盒

甲型流感病毒H1亞型(IAV-H1)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T

CLIAKitforMMP-8ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶

體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-10)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitThymosinα1犬α1

EREG重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4 0.5mg5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羥色胺受體4抗原

ING5重組人 ING5 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

CAMKV Protein Human 重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

IL18R1 Protein Rat 重組大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4 0.5mg5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羥色胺受體4抗原

CAMKV Protein Human 重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

EREG重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL18R1 Protein Rat 重組大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ING5重組人 ING5 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

AAV-293 (人胚腎細(xì)胞)鴨白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai neuroblastoma aibody (NB-Ab) ELISA Kit 人抗神經(jīng)母細(xì)胞瘤抗體(NB-Ab)檢測(cè)試劑盒

HumanGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 人γ氨基(GABA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAChRab(Humanacetylcholinereceptoraibody)ELISAKit人乙酰受體抗體

鹽析法大量蛋白濃縮沉淀試劑盒5/10次

Mousepigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

羊階段特異性表面抗原-1檢測(cè)試劑盒   羊階段特異性表面抗原-1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   羊階段特異性表面抗原-1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：羊階段特異性表面抗原-1試劑盒、羊階段特異性表面抗原-1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

鴨主要組織相容性復(fù)合體檢測(cè)試劑盒   鴨主要組織相容性復(fù)合體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   鴨主要組織相容性復(fù)合體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：鴨主要組織相容性復(fù)合體試劑盒、鴨主要組織相容性復(fù)合體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

鴨免疫球蛋白E檢測(cè)試劑盒   鴨免疫球蛋白E試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   鴨免疫球蛋白E試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：鴨免疫球蛋白E試劑盒、鴨免疫球蛋白Eeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豬血小板衍生生長(zhǎng)因子檢測(cè)試劑盒   豬血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒、豬血小板衍生生長(zhǎng)因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。