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C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)

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C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞) 詳細資料

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)

商品屬性

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)

鑒定

STR鑒定正確

種屬

大鼠

生長特性

貼壁

細胞形態(tài)

成纖維細胞樣

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

大鼠細胞系

 

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)


商品介紹

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)

別稱 C-6; C 6; RGC-6; RGC6; RGc6

種屬 大鼠

年齡(性別) 不詳

組織來源 膠質(zhì)瘤,腦,膠質(zhì)細胞

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

參考資料(來源文獻)

膠質(zhì)細胞株C6是由Benda等用N-亞硝基甲脲誘導的大鼠膠質(zhì)瘤克隆,并經(jīng)過一系列的體外培養(yǎng)和動物傳代交替后建成的。C6細胞表達S-100;產(chǎn)生生長激素;糖皮質(zhì)激素作用下可以產(chǎn)生磷酸甘油脫氫酶。當C6細胞從低密度生長到滿瓶時,S-100產(chǎn)量增加10倍。

 

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 Ham's F-12K15% HS2.5% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3/

倍增時間 ~25-30小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37

受體表達情況 glucocorticoid receptor

基因表達情況 S-100 protein; produce glyceryl phosphate dehydrogenase in response to glucocorticoids; somatotrophin

細胞處理:

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)
1) 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)
(1)當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時,進行傳代。

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。

(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。

(5)細胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。

(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細胞,吹打細胞使其均勻分散。

(7)吸棄細胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

(8)根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

(9)細胞凍存

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)

公司正在出售的產(chǎn)品:

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)

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CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白

CD1E & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 蛋白

S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A12 (S100A12)

CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白

CLEC10A重組小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 Protein

CD1E & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 蛋白

CALR重組人 CALR / Calreticulin 蛋白 (Fc 標簽) Protein

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細胞接收后的處理:

C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞)
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。


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